Si les feuilles vertes des végétaux produisent du dioxygène à la lumière, est-ce également le cas des parties végétales qui ne sont pas vertes ?
Hypothèse: Les parties non vertes d’un végétal ne produisent pas de dioxygène à la lumière.
Pour mettre éprouver cette hypothèse, nous utiliserons les fleurs du chou-fleur qui sont blanches.
Matériel à vérifier
- un chou-fleur par groupe de 18 élèves
- un scalpel
- un ordinateur
- une sonde à O2
- une interface Ex.A.O
- un bioréacteur
- un agitateur sur vitesse moyenne
- un barreau magnétique
- une balance
- une cuillère à café
- un cristallisoir avec de la glace et de l’eau
- éprouvette graduée de 25ml
- une solution tampon phosphate à pH = 7,4
- bécher de 250ml
- 2 morceaux de gaze
- 1 seringue de 25ml
- une lampe
- un hachoir pour la classe
Méthodologie à lire avant de commencer
Première partie: obtention d’un extrait de fleurs de chou-fleur
- posez la coupelle sur la balance
- faites la tare
- pesez 40g de fleurs de chou-fleur
- coupez-le avec le scalpel
- rajoutez 50ml de la solution tampon phosphate: il s’agit d’une solution physiologique proche de celle dans laquelle vivent les cellules
- amenez votre préparation à la paillasse avec le blender
- faites broyer votre chou-fleur : à quoi ce broyage sert-il ?
- revenez à votre paillasse
- posez l’entonnoir sur le bécher de 250ml
- posez le bécher dans le cristallisoir contenant la glace
- rajoutez 4 épaisseurs de gaze sur l’entonnoir
- versez votre broyat sur la gaze
On obtient une suspension de mitochondries (organites cellulaires) et de molécules.
La deuxième partie consiste à faire la mesure oxymétrique de la suspension
- ouvrez le logiciel Latisbio en le cherchant sur l’ordinateur de paillasse
- cliquez sur la fenêtre centrale
- choisissez « O2 dissous«
- réglez le temps sur 4 minutes
- versez 20mL de la suspension dans l’éprouvette
- versez ces 20ml dans la cuve du bioréacteur
- lancez l’agitation de l’agitateur magnétique sur vitesse moyenne/rapide
- placez le couvercle du bioréacteur
- introduire la sonde à O2 en s’assurant qu’elle ne touche pas l’agitateur
- Mais vérifiez que la sonde soit bien dans le liquide
- vérifiez que les autres ouvertures présentes sur le couvercle soient bien fermées
- mettez les caches
Lancer la mesure en appuyant sur F10
- ajustez la fenêtre d’enregistrement en double-cliquant sur O2 dissous en mg/l, au niveau de l’axe des ordonnées
- Au bout de 2 minutes, allumez la lumière
- enlevez les caches
Appuyer sur F12 pour ajouter un marqueur
- faites une capture d’écran de votre enregistrement
Fin de la manip:
- videz le bioréacteur avec la seringue de 25ml
- videz votre seringue de 25ml dans l’évier
- récupérez l’aimant au fond du bioréacteur avec la passoire
- remettre l’aimant dans la boite ronde en plastique
- jetez le chou-fleur et la gaze dans les cuvettes noires prévues à cet effet sur la paillasse avec le blender
Rédigez un compte-rendu:
- A l’aide de votre enregistrement, et d’une raisonnement bien structuré, validez ou rejetez votre hypothèse : « Les parties non vertes d’un végétal ne produisent pas de dioxygène à la lumière.«
- présentez votre travail sous Word ou libre-office puis enregistrez-le sous PDF
- titrez votre graphique
- légendez votre graphique avec les différentes conditions
- rajoutez vos noms et prénoms
- lancez une impression
Préparations à faire au laboratoire avant le TP
Une solution tampon phosphate
Préparation pour 100 mL :
- 80 mL de solution d’hydrogénophosphate disodique (Na2HPO4) à 9,46 g.l-1 s’il est anhydre ou 23,86 g.l-1 s’il est hydraté
- 20 mL de dihydrogénophosphate de potassium (KH2PO4) à 9,06 g.L-1.
Cette solution tampon se conserve ensuite très bien au réfrigérateur
Ressources:
