TP : observer la photosynthèse à l’échelle du chloroplaste

D’après: https://svt-lycee-elorn.ovh/images/phototheque/metabolisme/photosynthese/fulls/hill11.png

On dit souvent que la forêt amazonienne est le poumon de la planète puisque les végétaux produirait du dioxygène, encore faut-il le prouver!

L’expérience réalisée par Mr Hill se manifeste par une libération de dioxygène, uniquement à la lumière et en présence d’un accepteur d’électrons appelé réactif de Hill.

L’avantage de cette manip est de travailler à l’échelle de l’organite, le chloroplaste. Si l’extraction est bien réalisée, les variations de dioxygène sont spectaculaires.

À vous de montrer que les végétaux produisent du dioxygène!

Matériel

une suspension de chloroplastes préparés en laboratoire, à froid et à l’obscurité (il faut fermer les volets de la salle)
un ordinateur
un logiciel EXAO
une sonde à O2
Une fiche d’utilisation de la sonde
une lampe puissante
une pipette
une propipette
une seringue de 1ml
une seringue de 20ml
du papier absorbant
un oxydant, le réactif de Hill

Méthode

travaillez à l’obscurité
reliez l’interface ExAO à la tour de l’ordinateur via un câble USB
ouvrez l’ordinateur de paillasse
ouvrez le logiciel LatisBio
changez la durée pour 10 minutes
installez l’agitateur magnétique dans la partie centrale du bioréacteur
remplissez complètement le bioréacteur à l’aide de la seringue de 20ml
enclenchez l’agitateur magnétique
installez la sonde à dioxygène
remplissez la seringue de 1ml de réactif de Hill (faire attention qu’il n’y ait pas de bulle d’air)
respecter une durée de mesure de 10 minutes
allumez la lumière
lancez la mesure en appuyant sur F10
au bout de 4 minutes, injectez DOUCEMENT le réactif de Hill
option: au bout de 8 minutes, éteindre la lumière et mettre les caches
pour arrêter une manip en cours, appuyez sur le bouton Echap du clavier