TP : réaliser des coupes végétales à colorer

Matériel:

Pour réaliser les coupes:

• Des bâtons de moelle de sureau,
• Une lame de rasoir ou un rasoir de coupe face plane,
• Des lames et lamelles,
• Microtome à main (facultatif).

Pour colorer les coupes:

• une allumette taillée en biseau,
• 6 verres de montre,
• eau et eau de javel, eau acétique à 1 %,
• carmino-vert (10 parties de carmin aluné + 1 partie de vert d’iode).

Méthodes:

RÉALISATION DE COUPES TRANSVERSALES (RACINES, TIGES OU FEUILLES)

RÉALISATION DE COUPES TANGENTIELLES DE TIGE

• 1 – Réaliser des coupes très fines et transparentes, tangentiellement à l’épiderme de la tige, privilégier la finesse à la longueur
• Les déposer coté interne sur le dessus, au fur et à mesure, sur une lame dans une goutte d’eau.
• La tige étant cylindrique, la coupe tangentielle montrera au microscope un liseré d’épiderme en périphérie qui permettra l’observation de la surface de l’épiderme
• 2 – Sélectionner les coupes les plus fines et transparentes et recouvrir d’une lamelle
• 3 – Ajouter de l’eau si nécessaire en déposant délicatement une goutte en bordure de la lamelle.

Coloration des coupes:

• Porter les coupes à l’aide de l’allumette taillée en biseau, dans un verre de montre rempli d’eau.
• Transférer ensuite les coupes dans les différents verres de montre en respectant les temps indiqués. (cf. la technique de coloration)
• Eau de Javel : 15-20 min
• Eau : 1min
• Eau acétique : 5 à 10 min
• Carmino vert : 3min
• Lavage eau distillée

Montage entre lame et lamelle: