TP : La mise en évidence du substrat de la mitochondrie

Une suspension de mitochondries a été obtenue à partir de navets. On propose deux substrats différents aux mitochondries :

  • Du glucose
  • Du pyruvate.

Le pyruvate est un composé issu de la coupure de la molécule de glucose en deux molécules. Cette coupure se déroule dans le cytoplasme.

Matériel :

  • Solution de glucose à 50g.l-1
  • Solution de pyruvate à ?
  • Bain marie à 40°C
  • Erlenmeyer
  • 2 seringues 1ml
  • 1 seringue 20ml
  • Bioréacteur
  • Agitateur
  • Sonde à O2
  • Un thermomètre

Méthode:

  • Allumez le bain marie et positionnez la température sur 40°C
  • Placez votre erlenmeyer dans le bain marie
  • Placez de l’eau tiède à 40°C autour de l’enceinte du bioréacteur
  • Introduire la suspension de mitochondries dans le corps principal du bioréacteur
  • Placez la sonde
  • Fermez l’enceinte avec le couvercle plus tous les bouchons
  • Préparez les deux seringues pour l’injection avec 0,2ml de glucose et 0,2ml de pyruvate
  • Lancez la mesure
  • A 1 minute, injectez le glucose
  • A 3 minute, injectez le pyruvate

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