TP/Extraction de pollens de tourbe

Sphaignes de la tourbière du col de Steige (patalano)

Les mousses et les sphaignes (photo ci-dessus) sont des filtres naturels à pollens : les pollens transportés par le vent se déposent sur le sol et sont facilement retenus entre les feuilles de ces végétaux.

Dans les tourbières (photo ci-dessous), l’épaisseur de sphaignes peut se faire sur plusieurs mètres et les pollens piégés sont alors conservés parfois sur plusieurs milliers d’années dans une sorte de terre végétale appelée tourbe.

Tourbière au col de Steige, Vosges (Patalano)

Comment fait-on pour extraire les pollens pris dans la tourbe ?

Matériel :

  1. De la Potasse, KOH, à 10 %
  2. 1 Tube à centrifugeuse (paillasse professeur)
  3. 2 Béchers de 125ml
  4. 1 bec électrique (paillasse professeur)
  5. 1 cristallisoir (paillasse professeur)
  6. 1 tamis de 125 µm (paillasse professeur)
  7. 1 Pipette en plastique
  8. 1 Agitateur en verre
  9. 1 Spatule
  10. De la gélatine glycérinée tiède (=un suppositoire fondu) coloré à la fuchsine

Réalisez un extrait de pollens de tourbe :

  • Chaussez les lunettes de protection 
  • Placez 25ml de tourbe dans le bécher de 125ml
  • Versez deux volumes de potasse à 10% pour un volume de tourbe (= destruction de la matière organique)
  • Remuez régulièrement quelques minutes avec l’agitateur
  • Placez le bécher sur le bec électrique (thermostat 5 environ) pendant 10 minutes
  • Remuez pendant l’ébullition : veillez a ce que ça ne déborde pas

Préparez les culots de centrifugation :

  • Filtrez sur un tamis de 125µm au dessus d’un cristallisoir (paillasse professeur)
  • Récupérez le filtrat qui contient les pollens et des petits débris végétaux grâce à la pipette plastique
  • Introduire ce filtrat dans un tube à centrifugeuse (paillasse professeur)
  • Placez votre tube dans la centrifugeuse
  • Important : placez, à l’opposé de votre tube, un autre tube avec exactement le même volume d’eau afin d’équilibrer
  • Centrifugez pendant 7 min à 2000 tr/min
  • Récupérez votre tube 
  • Jetez le surnageant.
  • Rajoutez de l’eau chaude (faites chauffer de l’eau distillée dans le 2e bêcher) pour remettre en suspension le culot puis remuez 
  • Recommencez la centrifugation au moins une fois

Confectionner les lames de pollens à observer :

  • Déposez 1 goutte de gélatine glycérinée tiède (=un suppositoire fondu) coloré à la fuchsine pour 1 goutte d’extrait sur une lame mince
  • Placer entre lame et lamelle
  • Observez

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