A partir du protocole présenté sur le site de l’académie de Bordeaux.
Les mousses et les sphaignes sont des filtres naturels à pollens : les pollens transportés par le vent se déposent sur le sol et sont facilement retenus entre les feuilles de ces végétaux.
Dans les tourbières l’épaisseur de sphaignes peut se faire sur plusieurs mètres et les pollens piégés sont alors conservés parfois sur plusieurs milliers d’années.
- Matériel :
Tube à essai
Potasse (KOH à 10 %)
Tube à centrifugation (20mL)
Bécher
Ciseaux
Pipette en plastique
Agitateur en verre
Filtre de 125 µm + entonnoir
- Protocole :
Réalisez un extrait de tourbe :
- Chaussez les lunettes de protection ;
- Dans un bécher, couper très finement le matériel végétal aux ciseaux ;
- Placez l’échantillon de tourbe dans un petit bécher deux volumes de potasse à 10% pour un volume de tourbe (destruction de la matière organique) puis remuer régulièrement quelques minutes.
- Placez le bécher sur le bec électrique pendant 10 minutes tout en remuant pendant l’ébullition (veillez a ce que ça ne déborde pas)
Préparez les culots de centrifugation :
- Filtrez sur un tamis de 125 µm au dessus d’un cristallisoir qui se trouve sur la paillasse professeur.
- Récupérez le filtrat qui contient les pollens et des petits débris végétaux dans un tube à centrifugation de 3ml.
- Centrifugez pendant 7 min à 2000 tr/min (mettre le même nombre du tubes pour équilibrer la machine) ;
- Récupérez votre tube puis jetez le surnageant.
- Rajoutez de l’eau chaude pour remettre en suspension le culot puis remuez ;
- Recommencez la centrifugation au moins une fois.
- Confectionner les lames de pollens à observer :
- Placer 1 goutte de fuschine pour une goutte d’extrait sur une lame mince pour colorer les grains de pollen.
- Placer entre lame et lamelle ;
- Observez.
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